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儲備溶液配製指南 —— DTT（二硫蘇糖醇）
二硫蘇糖醇（DTT，又稱 Cleland 試劑）是常用的還原劑，在蛋白生物化學實驗中用來還原二硫鍵， 保護巯基並穩定酶活性。由於容易氧化，建議儲備溶液新鮮配製。
化學資訊
| 名稱 | 分子式 | 分子量 | CAS |
|---|---|---|---|
| DTT | C₄H₁₀O₂S₂ | 154.25 g/mol | 3483-12-3 |
應用
- 蛋白二硫鍵還原
- 酶穩定劑
- SDS-PAGE 樣品處理
溶解性與操作
- DTT 為白色結晶粉末，在水中易溶解。
- 建議用無核酸酶水配製儲備溶液以保持活性。
- 溶液勿高壓滅菌，以免破壞還原性。
儲備液配製
按公式計算需稱量的 DTT 質量：
所需質量 = 分子量 × 體積 × 濃度
例如配製 10 mL 1 M：154.25 × 0.010 × 1 = 1.54 g
例如配製 10 mL 1 M：154.25 × 0.010 × 1 = 1.54 g
- 稱取 1.54 g DTT。
- 加入潔淨管中及 ~8–9 mL 無核酸酶水。
- 混合至完全溶解。
- 水定容至終體積 10 mL。
- 需無菌時可 0.22 µm 過濾。
- 分裝後 −20 °C 保存以降低氧化速率。
儲存與穩定性
- 固體 DTT 乾燥保存於 2–8 °C 下。
- 溶液儲備可 −20 °C 保存，建議分裝使用。
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