DTT 储备液配制指南

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储备溶液配制指南 —— DTT（二硫苏糖醇）

二硫苏糖醇（DTT，又称 Cleland 试剂）是一种常用的强还原剂，在蛋白生物化学实验中被用来 还原二硫键 (-S–S–)，保护巯基并稳定酶活性。水溶液易受空气氧化，应尽量新鲜配制。

化学信息

应用

• 蛋白二硫键还原
• 酶稳定作用
• SDS-PAGE 样品前处理

溶解性与操作

• DTT 为白色结晶粉末，在水中溶解性高，可形成澄清溶液。
• 建议用无核酸酶水配制储备液，避免氧化活性下降。
• 不宜高压灭菌 DTT 溶液，热处理会破坏还原性。

储备液配制

配制 1 M DTT 储备液可按公式计算所需质量：

1. 称取 1.54 g DTT 粉末。
2. 置入洁净管中，加 ~8–9 mL 无核酸酶水。
3. 轻轻混匀直至完全溶解。
4. 用水补至终体积 10 mL。
5. 需要无菌时可用 0.22 µm 滤膜过滤。
6. 分装保存于 −20 °C 以减少氧化。

储存与稳定性

• 固体 DTT 于干燥 2–8 °C 下长期稳定。
• 溶液形式宜分装后在 −20 °C 保存以延长活性。
• 建议关键实验当天配制工作浓度溶液。