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基於氯化鉀的PCR緩衝液用於優化DNA聚合酶活性。
基於氯化鉀的PCR緩衝液 – 成分
| 名稱 | 分子式 | 濃度 | CAS號 |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 9.0) | C₄H₁₁NO₃ | 10 mM | 77-86-1 |
| 氯化鉀 | KCl | 50 mM | 7447-40-7 |
| 氯化鎂 | MgCl₂ | 1.5 mM | 7791-18-6 |
| Triton X-100 | C₃₄H₆₂O₁₁ | 0.1% (w/v) | 9002-93-1 |
滅菌與儲存
- 滅菌：0.22 μm過濾。
- 儲存：分裝後-20 °C冷凍保存。
操作提示
- 緩衝液pH通常為8.0–9.5，可透過Tris-Cl調節。
- Triton X-100極為黏稠，建議使用低濃度儲備液，也可用Tween 20替代。
- 使用KCl配製PCR緩衝液時，MgCl₂濃度通常較低（約1.5 ± 0.25 mM）。
- 最佳PCR緩衝液取決於所用DNA聚合酶種類，請遵循酵素供應商建議。
- 直接使用無水氯化鎂時會放熱，建議少量多次加入部分溶劑中。
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