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基于氯化钾的PCR缓冲液用于优化DNA聚合酶活性。
基于氯化钾的PCR缓冲液 – 成分
| 名称 | 分子式 | 浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 9.0) | C₄H₁₁NO₃ | 10 mM | 77-86-1 |
| 氯化钾 | KCl | 50 mM | 7447-40-7 |
| 氯化镁 | MgCl₂ | 1.5 mM | 7791-18-6 |
| Triton X-100 | C₃₄H₆₂O₁₁ | 0.1% (w/v) | 9002-93-1 |
灭菌与储存
- 灭菌:0.22 μm过滤。
- 储存:分装后-20 °C冷冻保存。
操作提示
- 缓冲液pH通常为8.0–9.5,可通过Tris-Cl调节。
- Triton X-100极粘稠,建议使用低浓度储备液,也可用Tween 20替代。
- 使用KCl配制的PCR缓冲液时,MgCl₂浓度通常较低(约1.5 ± 0.25 mM)。
- 最佳PCR缓冲液取决于所用DNA聚合酶类型,请遵循酶供应商推荐。
- 直接使用无水氯化镁时会放热,建议少量多次加入部分溶剂中。
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