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DNA上样染料用于琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中追踪DNA迁移。
6X DNA上样染料 – 成分
| 名称 | 分子式 | 浓度 | CAS号 |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl (pH 7.6) | C₄H₁₁NO₃ | 10 mM | 77-86-1 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 60 mM | 60-00-4 |
| Orange G | C₁₆H₁₀N₂Na₂O₇S₂ | 0.4% (w/v) | 1936-15-8 |
| 溴酚蓝 | C₁₉H₁₀Br₄O₅S | 0.25% (w/v) | 115-39-9 |
| 二甲苯腈蓝FF | C₂₅H₂₇N₂NaO₆S₂ | 0.25% (w/v) | 2650-17-1 |
| Ficoll 400 | (C₁₂H₂₂O₁₁)n·(C₃H₅ClO)n | 15% (w/v) | 26873-85-8 |
灭菌与储存
- 灭菌：无需灭菌。
- 储存：分装1 mL，4 °C或−20 °C保存。
操作提示
- DNA Loading Buffer有多种配方，此处仅列举一种。
- 未添加染料前（至第4步），溶液可能呈现无色透明至黄色浑浊状态。
- 配制小体积溶液（如10 mL）时，定容前请确保管壁及管盖无残留溶液。
- 请选择合适容器，尽量在一个容器内完成操作，因为溶液较粘稠，不易移液。
- 染料浓度可自行调整：溴酚蓝和二甲苯腈蓝FF 0.03%–0.50% (w/v)；Orange G 0.15%–0.50% (w/v)。
- 高浓度染料提供更好对比色，但可能遮蔽共迁移DNA条带；预期有共迁移DNA片段时建议低浓度染料。
- Ficoll 400可用60% (v/v)甘油或40% (w/v)蔗糖替代；蔗糖溶液需冷冻保存。
- 含Ficoll 400的上样染料能更有效沉入琼脂糖，但成本较高。
- 三色上样染料能更清晰指示DNA片段分辨率，但成本亦较高。
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