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儲備溶液配製指南 —— Tris 緩衝液 (1 M, pH 7.2)
Tris（Tris(hydroxymethyl)aminomethane），又稱 Trizma 或 THAM，是分子生物學及生物化學中常用的緩衝劑。 其 pKa 在 25 °C 約為 8.08，適合作為 pH 7.2–9.0 範圍的生理緩衝液。Tris 緩衝液的 pH 隨溫度而變，配製時需在使用溫度下調整。
化學資訊
| 名稱 | 分子式 | 分子量 | CAS 號 |
|---|---|---|---|
| Tris Base | C₄H₁₁NO₃ | 121.14 g/mol | 77-86-1 |
用途
- pH 7.2–9.0 生物緩衝液
- 製備 TAE、TBE、TE 緩衝液
溶解性與操作
- Tris Base 為白色粉末，易溶於水。
- pH 隨溫度變化顯著，調節時請在實際使用溫度下完成。
1 M Tris.Cl (pH 7.2) 配製
- 稱取 121.14 g Tris Base 置於 1 L 容器中。
- 加入約 800 mL 去離子水，攪拌使其完全溶解。
- 溶液冷卻至室溫後再調 pH，避免熱狀態下調節。
- 緩慢加入濃鹽酸 (≈ 45 mL) 並監測 pH 至 7.2。
- 轉移至 1 L 量筒並用水定容至終體積 1000 mL。
- 如需無菌緩衝液，可高壓滅菌 20 分鐘。
儲存與注意事項
- 1 M Tris.Cl pH 7.2 為澄清無色溶液；如呈淡黃色，建議重新配製。
- 可在室溫下保存數週。
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