PIPES 儲備溶液配製指南

本指南介紹如何製備實驗室使用的特定莫耳濃度的PIPES儲備溶液。

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儲備溶液配製指南 —— PIPES

PIPES(哌嗪-2,4-雙(2-乙烷磺酸) 及其鈉鹽形式)是常用的兩性離子 Good’s 緩衝劑, 在生化和細胞生物學實驗中廣泛使用。PIPES 緩衝能力適用於約 pH 6.1–7.5 且對二價金屬離子 幾乎不形成絡合物,非常適合要求離子中性緩衝的應用。

化學資訊

  • CAS 號:5625-37-6
  • 分子式:C₈H₁₈N₂O₆S₂
  • 常見鹽形式:PIPES·2Na、PIPES·Na、PIPES·1.5Na、PIPES(游離酸)
  • 分子量:因鹽形式不同而異(如游離酸約 302.38 g/mol,二鈉鹽約 346.33 g/mol)。

緩衝劑特性與用途

  • PIPES 是一種兩性離子緩衝劑,在接近中性 pH 下具有良好緩衝效能。
  • 對金屬離子幾乎不形成絡合物,適用於含二價金屬離子的緩衝體系。
  • 用於蛋白質純化、層析、細胞培養培基以及顯微鏡固定液等緩衝溶液。

溶解性與操作注意事項

  • 游離酸形式在水中溶解性較差,通常需加入 NaOH 逐滴調 pH 才能溶解。
  • 鈉鹽形式溶解性更好,適合作為緩衝液配製的首選。
  • 如用於細胞培養等應用,請對緩衝液進行無菌過濾。

儲備溶液配製

以下為常見莫耳濃度的 PIPES 緩衝液配製示例:

示例(1.0 M PIPES,游離酸形式):
• 稱取 302.37 g PIPES 游離酸,加約 800 mL 去離子水。
• 攪拌過程中逐滴加入 NaOH(如 5–10 N)調整 pH 並使其溶解,目標 pH 約 6.8。
• 溶解並調整 pH 後,以水定容至 1 L。

或可按等莫耳比例混合單鈉鹽與二鈉鹽並調整 pH。

儲存與使用

  • 固體 PIPES 試劑請干燥保存於室溫;緩衝液儲備可冷藏保存。
  • 使用於敏感生物實驗時,請對緩衝液進行無菌過濾。

可用試劑資訊

名稱分子式分子量 (g/mol)CAS 號
PIPES·2NaC₈H₁₆N₂O₆S₂Na₂346.3376836-02-7
PIPES·NaC₈H₁₇N₂O₆S₂Na324.3510010-67-0
PIPES·1.5NaC₈H₁₆.₅N₂O₆S₂Na₁.₅335.34100037-69-2
PIPES(游離酸)C₈H₁₈N₂O₆S₂302.385625-37-6
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