EGTA 儲備溶液配製指南

本指南介紹如何製備實驗室使用的特定莫耳濃度的EGTA儲備溶液。

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儲備溶液配製指南 —— EGTA

EGTA(乙二醇四乙酸)是一種高度選擇性的鈣離子螯合劑,用於生化及細胞生物學實驗中控制自由 Ca2+ 濃度。 與鎂相比,EGTA 對鈣的親和力更高,因此常用於需要特異性螯合鈣的緩衝體系中。

化學性質

  • CAS 號:67-42-5
  • 分子式:C14H24N2O10
  • 分子量:380.35 g/mol

溶解性與操作注意事項

EGTA 在中性水中的溶解度較低,通常需要加入鹼性條件(例如 NaOH)來促使其完全溶解。 實際配製時,可先在鹼性水中溶解粉末,然後用緩衝液或水稀釋至目標體積。

  • 在鹼性條件下易溶;若 pH 降低可能出現沉澱。
  • 在中性 pH 水中溶解性有限,可加熱和超聲波協助溶解。

儲備溶液配製參考

下表為常用莫耳濃度的 EGTA 儲備液示例體積,可據此調整配製量:

1 mM: 每 1 mg 約需 2.63 mL
5 mM: 每 1 mg 約需 0.53 mL
10 mM: 每 1 mg 約需 0.26 mL

溶解後如有需要調整 pH,並用緩衝液或去離子水定容,必要時進行無菌過濾。

儲存與使用

  • 儲備液可分裝後在 2-8°C 保存數月。
  • 避免反覆冷凍與解凍;實驗使用前再稀釋為工作液。
  • 細胞實驗應使用無菌技術配製與保存。

應用場景

EGTA 常用於螯合鈣離子、製備鈣緩衝體系以及調控細胞內外 Ca2+ 濃度。 由於其對鈣的高選擇性,在需要區分鈣與鎂的實驗中尤為有用。

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