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Solution I 為質粒分離流程中用於重懸菌體並於鹼裂解前保護質粒 DNA 的緩衝液。
Solution I（質粒分離）—— 成分
| 名稱 | 分子式 | 濃度 | CAS |
|---|---|---|---|
| Tris-Cl（pH 8.0） | C₄H₁₁NO₃ | 25 mM | 77-86-1 |
| EDTA | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 10 mM | 60-00-4 |
| 葡萄糖（非必須） | C₆H₁₂O₆ | 50 mM | 50-99-7 |
| RNase A（可在使用前添加） | N/A | 0.01% (w/v) | 9001-99-4 |
Solution I 的功能
Solution I 用於重懸收集後的菌體。Tris-Cl 維持穩定 pH，EDTA 螯合二價金屬離子以抑制 DNase 活性，葡萄糖維持滲透壓，而 RNase A 則用於去除 RNA 雜質。
配製提示、滅菌與儲存
- Solution I 中的葡萄糖為可選成分；但若額外加入溶菌酶，則必須添加葡萄糖;
- 含葡萄糖的緩衝液容易滋生細菌，請妥善保存並於使用前仔細檢查;
- RNase A 的活性會隨時間於溶液中降低；含 RNase A 的緩衝液請於 4°C 保存，並於一個月內使用;
- RNase A 亦可於使用前單獨加入，最終濃度為 100 μg/mL;
- 滅菌方式：若不含葡萄糖可進行高壓滅菌；否則請將 Tris-Cl、EDTA 與葡萄糖溶液分別滅菌後再行混合;
- 儲存條件：4°C;
- 市售 Solution I 多半不含葡萄糖，且 Tris-Cl 濃度通常為 50 mM，請自行評估是否符合實驗需求。
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