以下部分內容由AI生成，尚未經過嚴格審核，可能存在錯誤。BioCalculator App內的資訊均由人工整理，並經過嚴格校驗，可下載App查看。
RIPA裂解緩衝液（Radio Immuno Precipitation Assay buffer）是一種廣泛使用的細胞/組織裂解緩衝液，用於提取總蛋白，包括膜蛋白、胞質蛋白和核蛋白。由於含有離子與非離子去垢劑組合，其能有效溶解蛋白，同時在下游如Western blot與免疫沉澱實驗中常保留多數抗原表位。
RIPA裂解緩衝液 – 成分
| 名稱 | 分子式 | 濃度 | CAS號 |
|---|---|---|---|
| Tris‑Cl (pH 7.4) | C₄H₁₁NO₃ | 50 mM | 77‑86‑1 |
| 氯化鈉 | NaCl | 150 mM | 7647‑14‑5 |
| NP‑40 | (C₂H₄O)nC₁₄H₂₂O | 1% (v/v) | 26027‑38‑3 |
| SDS (非必須) | C₁₂H₂₅O₄NaS | 0.1% (w/v) | 151‑21‑3 |
| 脫氧膽酸鈉 | C₂₄H₃₉NaO₄ | 0.5% (w/v) | 302‑95‑4 |
| EDTA (非必須) | C₁₀H₁₆N₂O₈ | 1 mM | 60‑00‑4 |
滅菌與儲存
- 滅菌：通常無需滅菌；含有去垢劑的緩衝液如需除菌可過濾（0.22 μm），但不建議高壓滅菌以免破壞去垢劑或EDTA。
- 儲存：室溫或4 °C；使用時請置於冰上。
操作提示與說明
- 在使用當天加入蛋白酶與磷酸酶抑制劑（如抑蛋白酶肽、亮抑酶肽、胃蛋白酶抑制劑、PMSF、Na₃VO₄、NaF）以防止蛋白降解；PMSF在水溶液中非常不穩定，應於使用前立即添加。
- 在部分配方中，可使用Triton X‑100替代NP‑40。
- 若需保留蛋白質之間的相互作用或減少去垢劑造成的變性，可選用不含離子型去垢劑的緩衝液。
- 脫氧膽酸鈉濃度可於0.1–1%範圍內依實驗需求調整。
- 所有裂解步驟應在冰上或4 °C 下進行以最大限度地減少蛋白降解和變性。
Preview
