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储备溶液配制指南 —— 0.2 M 正钒酸钠(Na₃VO₄)溶液
正钒酸钠(Na₃VO₄)在生化实验中常用作**磷酸酶抑制剂**,通常配制为**200 mM(0.2 M)母液**。为了获得最大活性,需要通过调节 pH 和反复加热除去聚合的钒酸根,使溶液在 pH 10 下保持无色和稳定。
实验目的
配制 **20 mL 0.2 M** 正钒酸钠储备溶液,用于细胞裂解缓冲液或酶学实验。
溶液组成
- 0.2 M 正钒酸钠(Na₃VO₄)水溶液
实验材料
- 正钒酸钠固体
- 6 M 盐酸(HCl)
- 去离子水或 Milli‑Q 水
- 50 mL 带盖聚丙烯管
- 微波炉或沸水浴锅
- pH 计或测试纸(可测到 pH 10)
- 量管/微量移液器
- 个人防护装备(手套、护目镜、实验服)
配制步骤
- 步骤1
称取 **0.736 g** 正钒酸钠(分子量 183.91)置于 50 mL 带盖管中,加入 **15 mL** 去离子水,并颠倒混合直至溶解(≈ 5 分钟)。 - 步骤2
使用 6 M 盐酸滴加至溶液 **pH 10.0**,每次约 10 µL 并混匀。溶液 pH 初值约 13.5,加酸时溶液可能呈黄色。 - 步骤3
将溶液置于沸水浴或微波炉加热,直至溶液变为**无色**,然后冷却。 - 步骤4
冷却后再度调至 **pH 10.0**,重复加热/冷却循环 **2–3 次**,直至溶液冷却后保持无色且 pH 稳定。 - 步骤5
用去离子水定容至 **20 mL** 并通过颠倒混匀。
注意:反复调 pH 和加热可使聚合钒酸根去除,得到稳定的活性母液。请在容器上标注浓度、pH 和制备日期,将母液分装并在 **‑20 °C** 储存。如溶液变色或 pH 不稳定,应丢弃。
可用试剂
| 名称 | 化学式 | 分子量 | CAS |
|---|---|---|---|
| 正钒酸钠 | Na₃VO₄ | 183.91 | 13721‑39‑6 |
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